回收20立方優(yōu)尼克環(huán)氧乙烷滅菌柜

操作程序

(1) 根據(jù)試驗要求，制備枯草桿菌黑色變種芽孢懸液和菌片。菌片放入雙層聚乙烯塑料袋內(nèi)密封包裝，每袋2片。每次試驗用20袋。

(2) 將滅菌器上、中、下3層，每層內(nèi)、中、外各設一點，共設9點。每點物品中間布放1袋，共需18袋試驗菌片。另將一袋（2片）菌片放置在室溫條件下作為陽性對照。

(3) 按使用說明書所規(guī)定的環(huán)氧乙烷濃度、作用時間、柜內(nèi)的溫度和相對濕度，在滿載條件下進行環(huán)氧乙烷滅菌處理。滿載用物品，隨滅菌器用途而定。處理完畢，取出菌片，分別移種于5 ml 營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基中，置37℃ 培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)，7d后觀察最終結(jié)果(定性培養(yǎng)檢測)。

對難以判斷結(jié)果的營養(yǎng)肉湯管，取其中0.2ml懸液接種營養(yǎng)瓊脂平板，用無菌L棒涂抹均勻，置37℃ 培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)。48h后涂片染色，顯微鏡下觀察菌落形態(tài)，或進一步做其他試驗，判斷有無生長或生長的是否為試驗菌。若為非試驗菌，則應重新進行試驗。

(4) 測試中，應同時設立定性和定量陽性對照組與陰性對照組。

(5) 定量陽性對照組，以同批試驗用菌片置室溫下，待消毒或滅菌試驗組達規(guī)定作用時間后，立即將該菌片2片分別放入含5.0mlPBS試管中，各振敲打80次。取洗液按2.1.1.3 所示方法進行活菌培養(yǎng)計數(shù)。

(6) 定性陽性對照組，以同批試驗用菌片置室溫下，待滅菌試驗組達規(guī)定作用時間后，立即將該菌片2 片，分別接種于5.0ml 營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基，放入溫箱中作定性培養(yǎng)，觀察有細菌生長情況。

(7) 陰性對照組，以同批次試驗用未染菌樣片2 片，分別接種于5.0ml 營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基，同時將未接種過的營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基放入培養(yǎng)箱中作定性培養(yǎng)，觀察有無細菌生長。

(8) 試驗重復5 次。

(9)在5次試驗中，每次試驗中的陽性對照菌片，回收菌量均應在5×10cfu/片～5×10cfu/片；定性陽性對照組，細菌生長良好；陰性對照應無菌生長。陽性或陰性對照若有不符合上述要求的結(jié)果，試驗作廢，重新進行。

評價規(guī)定

在5 次滅菌試驗中，每次試驗中的定量陽性對照組，檢測回收菌量均達5 × 10cfu/ 片～5 × 10cfu/ 片；定性陽性對照組，細菌生長良好。陰性對照應無菌生長。所有試驗菌片全部無細菌生長時，可判為滅菌合格。

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